来源:汪清新闻网 | 2023-04-04 10:43:08 |
定量蛋白质组是指对特定已知蛋白质进行质谱检测,而不会像发现蛋白质组那样对所有未知蛋白进行全检测。定向蛋白质组的核心是利用串联四级杆质谱特有的MRM扫描方式来定向检测蛋白质,通过软件计算要检测蛋白质的肽对应的母子离子对,用串联四级杆质谱进行MRM扫描,得到MRM色谱峰,一般还会进行MSMS扫描,以对这些肽的MRM进行序列确认,或利用 MSMS进行定性和翻译后修饰位点检测等。
定量蛋白质组学的研究内容是什么?
1.蛋白质鉴定:可以利用一维电泳和二维电泳并结合Western等技术,利用蛋白质芯片和抗体芯片及免疫共沉淀等技术对蛋白质进行鉴定研究。
2.翻译后修饰:很多mRNA表达产生的蛋白质要经历翻译后修饰如磷酸化,糖基化,酶原激活等。翻译后修饰是蛋白质调节功能的重要方式,因此对蛋白质翻译后修饰的研究对阐明蛋白质的功能具有重要作用。
3.蛋白质功能确定:如分析酶活性和确定酶底物,细胞因子的生物分析/配基-受体结合分析。可以利用基因敲除和反义技术分析基因表达产物-蛋白质的功能。另外对蛋白质表达出来后在细胞内的定位研究也在一定程度上有助于蛋白质功能的了解。 Clontech的荧光蛋白表达系统就是研究蛋白质在细胞内定位的一个很好的工具。
4.对人类而言,蛋白质组学的研究最终要服务于人类的健康,主要指促进分子医学的发展。如寻找药物的靶分子。很多药物本身就是蛋白质。
定量蛋白质组学的优势是什么?
质谱方法比抗体方法更先进的一个原因,就是已经开发出了一种新的定向分析技术,比生产一个新的抗体要快得多,并大大减少了检测特异性方面的问题(抗体方法存在交叉反应的问题)。虽然抗体方法在低丰度蛋白的检测方面更加灵敏,但是质谱技术的一个明显优势就是能在单个实验中检测多种蛋白,比如说,系统生物学研究人员可以了解到一蛋白网络中蛋白水平的波动,或者临床研究人员能检测到某种疾病状态下,一组生物标记物的变化情况。
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